一起金黃色葡萄球菌食物中毒的病原學分析

　　

　　唐燕

　　

　?。ㄌK州工業園區疾病防治中心，江蘇蘇州215021）

　　

　　摘 要：目的：對食物中毒中所產生的致病菌進行檢測。方法：根據國家標準，使用增菌培養基、選擇性培養基、顯 色培養基和細菌生化鑒定系統分離和鑒定致病菌。結果：3份樣均檢出金黃色葡萄球菌，其中符合鑒定結果的概率為99%。 結論：引起食物中毒的致病菌為金黃色葡萄球菌。

　　

　　關鍵詞：食物中毒；Baird-Parker瓊脂平板；金黃色葡萄球菌

　　

　　金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）屬于革蘭氏陽 性菌，是常見的食源性致病菌，在自然界中廣泛分布，通過 空氣及接觸等傳播，可對食品造成污染叫在條件適宜的情 況下，會產生腸毒素，導致多種毒性蛋白的產生，誘發食物 中毒及金黃色葡萄球菌類毒血癥病癥。金黃色葡萄球菌多存 在于環境中以及人與動物的皮膚粘膜上，正常人的帶菌率為 30%?50%,人手上有14%?44%的帶菌率。實驗室研究 中，開展食物中毒樣本的病原菌檢驗已成為公共衛生問題的 重要內容。本實驗釆用Baird-Parker瓊脂平板和VITEK2全 自動細菌生化鑒定儀相結合，開展病原菌病原學檢驗，可作 為傳染源控制及致病菌控制的依據

　　

　　1材料與方法

　　

　　1.1材料

　　

　　1.1.1培養基與試劑

　　

　　亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）,緩沖蛋白蹤水（BPW）, 7.5%NaCl肉湯，志賀氏菌增菌肉湯，科瑪嘉沙門氏菌顯色 培養基、Baird-Parker瓊脂平板、腦心浸出液肉湯、凍干血漿、 XLD培養基、血瓊脂平板、HE瓊脂，北京路橋技術有限公司； GP革蘭氏陽性細菌鑒定卡，購自美國bioMerieux. Ine；以 上所用試劑均在有效期內㈣。

　　

　　1.1.2檢驗儀器

　　

　　恒溫隔水式培養箱（型號為HP-9270）；全自動細菌 生化鑒定儀器（型號為VITEK2）；生物安全柜（型號為 HFsafe-1200）«

　　

　　1.2菌株分離與鑒定

　　

　　沙門氏菌、志賀氏菌及金黃色葡萄球菌的檢測主要根據 《食品安全國家標準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗》（GB 4789.4—2016）、《食品安全國家標準食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗》（GB 4789.10—2016）及《食品安全 國家標準食品微生物學檢驗志賀氏菌檢驗》（GB 4789.5— 2012）,應用VITEK2全自動細菌生化鑒定儀開展細菌生化 鑒定。

　　

　　2結果與分析

　　

　　2.1流行病學調查

　　

　　迷客夏圓融二店是一家飲品店，2020年3月17日某家 單位的10名員工在食用了迷客夏的飲品后相繼出現嘔吐、 腹瀉等癥狀。首發病例于3月17日13： 40首次出現惡心、 嘔吐（3次）、腹痛、腹瀉（3次）。該病例于17日14： 40到 九龍醫院就診。余9名病例的主要臨床表現為惡心、嘔吐、 腹痛、腹瀉和發熱等。經抗菌素和輸液治療，現已轉歸良好。 在中心接報完成后，開展現場調研，并進行釆樣干預，釆集 3種口味的朵朵云樣品送檢。

　　

　　2.2分離與增菌培養

　　

　　3份樣品稱量后，分別添加至緩沖蛋白豚水（BPW） [3], 7.5%NaC 1及志賀菌增菌肉湯中，均質，于36。（3培養18h； 將完成增菌后的上述樣品，分別接種到科瑪嘉沙門氏菌顯色 平板、Baird-Parker瓊脂平板、血瓊脂平板、HE瓊脂平板 和XLD瓊脂平板，于36 °C培養24 h。結果顯示，血瓊脂 平板上可見金黃色、圓形、不透明的可疑金黃色葡萄球菌菌 落，Baird-Parker瓊脂平板上可見圓形、光滑、凸起、濕潤、 直徑為2 mm的可疑金黃色葡萄球菌菌落。在初分離培養中, 由于樣品中存在較少的菌量，會導致遺漏問題的產生，因此 需要應用增菌培養物開展再分離培養。在血瓊脂平板上，3 份樣品均呈現金黃色，形狀為圓形，不透明，表明光滑，周 圍部位存在溶血圈的可疑菌落生長。在Baird-Parker瓊脂平 板上有圓形，光滑度較高，濕潤度較高，凸起，直徑為2 mm, 顏色為灰色，邊緣為淡色，周圍存在渾濁帶，外層部位存在 透明帶的可疑菌落生長。其余平板均無可疑菌落生長。

　　

　　2.3純培養

　　

　　在Bahd-Paiker瓊脂平板上挑取單個菌落分純在血瓊脂平 板上，并挑^血瓊脂平板的可疑單菌落，置36。。培養24h。 2.4初步鑒定

　　

　　涂片鏡檢：3份樣品的鏡檢結果均為革蘭氏陽性球菌， 以葡萄球形狀排列，無芽抱，無莢膜。

　　

　　2.5血漿凝固酶試驗鑒別

　　

　　在血瓊脂平板上挑選單個菌落，轉接至5 mL腦心浸出 液培養基試管中，于36。（3培養24h。吸取0.5 mL無菌生理 鹽水到凍干血漿西林瓶中，搖勻，再加入腦心浸出液培養 物0.3mL,混合均勻后于36。（3培養，每隔0.5 h觀察1次， lh后出現凝固現象，則為血漿凝固酶陽性。在血瓊脂平板 上進行純培養物的挑選，用0.45%氯化鈉液制備成0.68麥氏濃度的菌懸液，接種GP革蘭氏陽性細菌鑒定卡，生化鑒 定應用VITEK2全自動細菌生化鑒定儀，鑒定結果為金黃色 葡萄球菌，在3份樣品中，金黃色葡萄球菌均存在一致性的 生化結果。

　　

　　3結語

　　

　　金黃色葡萄球菌腸毒素可耐受100 °C煮沸30 min而不 被破壞，并能抵抗胃腸道中蛋白酶的水解作用。若人們食用 了金黃色葡萄球菌所污染的食物，可引起腹瀉及嘔吐等問 題，誘發急性胃腸炎四。據鄭艷敏等報道，2014—2018年 蘇州市217次食源性疾病暴發事件中，7.37%為金黃色葡萄 球菌誘發可導致以嘔吐和腹瀉為主的急性胃腸炎癥狀閔。本 次食物中毒事件中極有可能存在食品間交叉污染的情況，應 當予以重視，并對本地區的食品生產經營者加以引導。

　　

　　參考文獻

　　

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