探討快速檢測方法在食品微生物檢測中的應用
探討快速檢測方法在食品微生物檢測中的應用
傳統的人力食品安全檢測已經被更科學的檢測方法和精密的檢測儀器所取代，為了避免因為檢測漏洞導致食用者食用后出現中毒或者身體不適，食品微生物檢測技術隨著科技的發展不斷優化?？焖贆z測方法作為食品微生物檢測中的一種新型檢測方法，其對于食品微生物檢測的作用還在探索過程中。本文以現階段常用的檢測技術為依據，分析快速檢測方法在食品微生物檢測中的應用和其優點。
關鍵詞：快速檢測方法；食品微生物檢測；應用
中圖分類號：TS207.4
相較于傳統自給自足的小農經濟模式下的食品加工，現階段食品在采購前都會經歷生產、加工、運輸這3個環節，被微生物污染的可能性大大增加。被微生物污染的食品會因為微生物的繁殖腐敗，如果人們食用被微生物污染的食品，不僅因為食物中毒而產生嘔吐、腹瀉等癥狀，微生物污染程度嚴重還會危及人們的生命安全?，F階段環境污染對食品污染的影響加劇了人們對污染食品的恐懼，因此選取科學合理的食品安全檢測方式是食品安全的基礎保障。
快速檢測方法應用于食品微生物檢測的意義
經濟發展帶動了我國的食品需求，這種需求促進了我國食品行業的發展速度，繁多的食品加工種類加大了食品檢測的難度。因為經濟發展速度快使得我國現階段的食品檢測標準還有許多漏洞，美食多樣化的發展和全球化的擴展速度加大了食品安全檢測的壓力，在食品的生產過程中和加工過程中，食品加工企業為了延長食品的保質期會加大化學添加劑的使用劑量，含有過多添加劑的食品被人們食用后有諸多危害，輕則引發食物中毒或者各種疾病，重則危及人們生命[1]。傳統的顯微鏡檢測不僅會產生檢測漏洞使得被微生物污染的食物流向市場危害人們身體，而且顯微鏡檢測的效率較慢，不僅檢測結果的準確度低，而且檢測人員的工作量較大。正是因為傳統的顯微鏡檢測技術的弊端太過明顯，所以促進了快速檢測技術在食品微生物檢測中的應用。使用快速監測技術在提高被檢測食品的安全性的前提下，減少了檢測人員的工作量。
在食品微生物檢測中常用的快速檢測技術
免疫學技術
酶聯免疫吸附技術
將已知抗原或抗體吸附在聚苯乙烯微量反應板或其他固相載體的表面，使酶標記過的抗原抗體在聚苯乙烯微量反應板或其他固相載體的表面進行充分反應，之后將液體中的游離成分進行洗滌清除，這就是快速檢驗法中常用的ELISA（酶聯免疫吸附技術）技術的基本實驗方法。在此項實驗中常用的試驗方法有雙抗體夾心法和間接法，雙抗體夾心法常用于檢測大分子抗原，間接法闖勇于檢測特異抗體。因為ELISA技術在現代微生物檢測中的廣泛應用，其靈敏性強、檢測速度快的優點在應用中得以充分發揮[1]。
免疫層析技術
把檢測樣品放置到條狀纖維膜上使其涌動，通過層析和免疫反應的雙重作用使得檢測樣品在含有配體的纖維膜上顯現，然后通過著色標記其中蘊含的微生物進行分析，這就是Immuno chromatography（免疫層析技術）技術的監測方式，作為免疫學技術的基礎技術，Immuno chromatography技術在食品微生物檢測過程中應用廣泛[2]。檢測員通過免疫層析技術可以測定被檢測食物樣本中的Listeria monocytogenes（李斯特菌），方法是在檢測過程中使用掃描儀器對試紙條中的T線、C線等光密度值進行掃描，10min就可完成測定工作，測定限為：0.35×106-0.35×109CFU/ml。免疫層析技術的檢驗效率較高，所需時間少，在食品檢驗工作中應用較為廣泛[3]。
代謝學技術
通過進行DNA的天然復制，進行體外DNA分子擴增的分子生物學技術稱為PCR（單鏈構態多項性分析技術）技術，此項技術的主要作用是擴增位于兩段已知序列之間的DNA區段。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環后，DNA擴增2?倍。作為代謝學中的基礎技術之一，PCR技術是保證食品微生物檢測結果科學合理的重要技術，因此被廣泛應用于現代食品微生物檢測試驗當中[4]。作為一項在美國研發推廣的技術PCR技術在我國的應用時間較晚，現在仍然處于優化階段，其對食品中蘊含的細菌檢測速度快、檢測結果準確率高的特性加快了PCR技術應用于食品微生物檢測的速度。
分子生物學技術
隨著科學技術的發展，分子生物學技術也逐漸被應用于食品微生物檢測中。分子生物學的基因芯片技術在食品微生物檢測過程中的應用效果比較明顯，其主要對特異性微生物的檢測效果較好。在應用分子生物學技術檢測食品微生物之前，檢測人員首先要進行芯片點樣中的寡核苷酸的提取，提取成功后進行DNA的擴列，其次對實際檢測中的微生物進行熒光標記，最后以試驗標準為依據進行數據融合。做完準備工作后在進行檢測就會得出食品樣本中的微生物檢測結果，通過分析對比后就可知道食品合格與否，從根源上杜絕不合格食品流入市場威脅人們身體健康。
傳感器檢測法
基因傳感器
“將兩種DNA分子相互組合，形成一個全新的DNA分子鏈，通過DNA分子鏈進行物理信號的傳遞與接收，然后通過換能器的形式展現”是基因傳感器的基本原理。使用基因傳感器進行食品微生物的檢測不僅操作方法較為簡單，而且檢測時間也比傳統顯微鏡的檢驗時間短，因此基因傳感器在實際食品微生物檢測過程中發揮了巨大的應用價值[5]。
生物傳感器
“被測分子和敏感材料的特異性相結合，兩者結合后發生的化學反應導致離子強度、離子顏色、離子信號發生變化，從而將其轉化為電信號”是生物傳感器的基本原理。使用生物傳感器以間接的方式進行檢測，利用生物傳感器的靈敏度和特異性提高了食品微生物檢測的準確性。
以濾紙為載體的測試技術
大腸菌群、大腸桿菌紙片熒光法是濾紙測試方法的技術重點，此項技術是由上海醫科大學預防醫學研究所研制的。大腸菌群檢驗方法有很強的選擇性，不會出現假陽性的結果。紙片法的主要優點是：檢出率高，體積較小，操作簡便，培養時間短，占用空間少，特別適用于實驗空間小的實驗室及野外操作[6]。以濾紙為載體的測試技術的主要優點如下：首先，進行快速檢測中檢測食物微生物的檢測過程中，一般情況下檢測樣本較少，在檢測過程中避免了大量玻璃器皿的使用，小規模的檢驗降低了檢測操作難度，少量的檢測樣本不僅便于運輸、攜帶方便，而且減少了樣本采購的費用，使得此項檢驗的環境需求低，可在野外場地、生產現場直接進行。其次，快速測試片可以在取樣時同時接種，結果更能反映當時樣本中真實的細菌數，避免了因為接種時間的不固定導致細菌繁殖的數量增多。最后，相較于對檢測時間和檢測場地有固定要求的床柜顯微鏡檢測方法，快速測試法可以在基層環境和生產車間直接檢驗的模式降低了傳統模式下企業送檢的費用。
快速檢測方法應用于食品微生物檢測的優點
檢測結果更科學
應用快速檢測方法檢測食品微生物能夠同時進行“接種”和“取樣”這兩項工作，這樣的檢測流程不僅避免了傳統檢測技術需要進行較長時間的細菌繁殖工作，而且因為檢測工作的迅速性和檢測工作的流暢性減少了傳統檢測方式因檢測過程的原因產生的數據誤差率，使得食品微生物檢測的具體結果更加科學?？茖W的檢測數據為食品安全提供了基礎的數據保證。
檢測速度更迅速
因為快速檢測技術有先進的技術支持和精密的儀器支持，所以使用快速檢測方法進行食品微生物檢測的結果比傳統顯微鏡檢測的結果速度更快，在結束快速檢測方法檢測食品微生物后，檢測產生的廢渣和廢液比傳統檢測技術少，不僅能夠減輕大量的食品微生物監測后的廢渣廢液帶來的環境污染[7]。而且較少的器皿清洗也減輕了食品微生物檢測工作人員的日常工作量，進一步提高食品微生物的監測工作效率。
結束語
綜上所述，現階段很多快速檢測方法都應用于食品微生物檢測過程中，其中就有：代謝學技術、免疫學技術、分子生物學技術、傳感器檢測法等。這些檢測技術均可以在較短的時間內完成食品微生物檢測工作，而且準確度較高。因此在進行食品微生物檢測時，檢測人員要結合實際情況科學的選擇檢測方法，從而提高食品安全質量，為人們身體健康提供基礎保障。
侯樂啟 山東省棗莊市嶧城區疾病預防控制中心
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