水溶性黨參多糖提取工藝的研究
黨參是屬于植物種類中的桔???,作為我國傳統中藥之一,人們服用黨參可以補中益氣,生津,養血,健脾益肺等。對醫治脾肺虛弱、氣短、心悸、食少便溏、虛喘咳嗽,內熱消渴等癥狀有很好的效果,經研究表明,黨參與多種藥物一同煎煮,起到治愈癩瘕、眩暈、充血性心力衰竭等病癥?,F代研究表明,黨參中發現多糖、蒽醌類、生物堿等,其中黨參多糖具有增強機體的免疫、抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、降血糖等作用。本研究以黨參為素材,建立了黨參水溶性多糖的響應面提取方法。
材料與方法
材料
黨參采自湖北省神農架林區,乙醇、硫酸、苯酚、氯仿和正丁醇等均為分析純,購自中國藥品生物制品檢定所。
試驗方法
多糖的提取與檢測。稱取黨參粉末,采用水提醇沉的方法提取多糖。多糖的檢測采用苯酚-硫酸法。
單因素試驗和響應面優化試驗。單因素實驗研究A( 液料比)、B(提取時間) 和C(提取溫度)對多糖提取的影響,在單因素分析基礎上,確定三種因素的3 個最適水平值,進行多因素響應面優化試驗。進一步通過Box-Behnken 的中心組合試驗優化多糖提取工藝。
多糖的分離和純化。多糖的分離和純化參照文獻6中的方法。
結果與分析
多糖提取工藝條件單因素試驗結果和響應面優化實驗
在單因素檢測時,液料比20:1、提取時間3h和提取溫度70℃時,多糖的吸光值為最大值。依據中心組合實驗設計(Box-Benhnken)原理,使用Design-Expert 7.13軟件進行響應面的擬合與剖析。選取X1液料比、X2提取時間(h)、X3提取溫度(℃)3個因素,采用三因素三水平的響應面法展開試驗設計。
提取黨參多糖的液料比(X1),提取時間(X2),提取溫度(X3)的為三要素,得出的試驗結果見下表。表中可見有17個試驗點,分別為13個為析因點,零點數為4個。析因點是三個自變量,標記為X1、X2、X3,構成的三維頂點,以零點構成區域的中心點。零點的實驗次數一共為四次,預算實驗誤差。通過Design—Expert 7.1 3軟件,處理實驗所得數據,多元回歸擬合所得實驗數據,得出二次多項回歸模型。用Design—Expert 7.1 3軟件,處理表二所得實驗結果,應用分析功能對回歸模型和回歸模型系數進行顯著性分析。
整個模型的P值為0.0008 (P <0.01),表明二次方程模型是顯著的;失擬值為0.1840(P>0.05),表明模型選擇合適;模型是總計回歸系數R2 = 0.9523,代表此模型可用來實際測試,比較多糖提取試驗的理論評估。從方差分析結果可以看出,模型的液料比(X1)、提取時間(X2)對多糖提取率影響明顯(P<0.01),提取溫度(X3)(P>0.05)不明顯。模型的液料比(X1)、提取時間(X2)對多糖提取率有高度明顯的影響(P<0.01),表面各個影響因素與響應值不存在線性關系。
多糖提取最佳條件極其驗證實驗
根據數據模型,得出,黨參多糖提取最佳條件為,時間為1.25h、溫度位62.84℃、液料比20:1,理想值為0.699。采用時間為1.25h、溫度位63℃、液料比29.4的條件進行驗證,5組的檢測結果分別為0.6868、0.700、0.6891、0.6697和0.6785,平均值為0.6848,與理論值相比97.97%符合,相對誤差為2.03%??梢姶四P涂煽?,可以用來作為黨參多糖提取的模型,并用來優化黨參多糖提取工藝。
本研究,提取了黨參多糖提取中的三個變量,(1)提取溫度、(2)提取時間、(3)液料比,通過三因素三水平實驗,對黨參多糖提取的條件優化進行了試驗。采用響應面法,構建了三要素多糖提取率數學模型,通過確定因子與指標之間的數據,對模型的顯著性進行檢驗,對各個要素間的作用進行剖析鉆研,從中優化出最佳工藝條件。聯結實際情況,應用軟件對數據進行剖析,得出最好的條件是,時間1.25h,溫度62.84℃,最合理液料比20:1。檢驗結果顯示;本實驗所優化的提取條件,與回歸分析基本一致,對黨參多糖提取工藝的改進具有指導作用。清除實驗顯示:對各種自由基,黨參多糖的清除作用都比較明顯,由此可得出,黨參多糖擁有顯著的抗氧化性。
宋平 鞍山市糧油質量衛生監測站

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