□ 熱比古麗·沙吾提 王甜 新疆維吾爾自治區水產科學研究所 農業部西北地區漁業資源環境科學觀測試驗站

摘　要：在水質環境的監測中，微生物檢測是一項重要內容。與化學檢驗不同，水質微生物檢驗是一個不斷變化的生物體。在微生物檢驗中由于檢測結果的準確性受多方面因素的影響，因此,只有加強對微生物檢驗質量的控制，才能確保檢測結果準確無誤。

關鍵詞：水質微生物檢測 影響因素 質量控制

引言

本文從人員、環境、儀器設備、培養基、樣品的采集這五個方面闡述了影響水質微生物檢驗的相關因素，并從各個環節著手，希望通過加強水質微生物檢測的質量控制來提高微生物檢驗工作的質量，進而保證檢驗檢測結果準確可靠。

1 常見水質微生物檢測結果的影響因素

1.1 人員

微生物檢驗人員上崗前應接受與其所承擔的工作任務相適應的培訓，并對培訓技能進行資格確認后取得上崗證。檢驗人員需熟悉所承擔檢驗項目的相關標準、規范和操作規程，能獨立負責并正確評價檢測結果;熟練掌握所用儀器設備的性能和使用方法，并嚴格按照操作規程進行操作;還應熟悉微生物檢驗檢測安全操作知識和消毒知識。

1.2 儀器設備

微生物實驗室的儀器設備應以一臺一檔的方式建立檔案，檔案則應當包含其基本信息。此外，每臺儀器應安排保管人員負責儀器設備的保管和日常維護。目前，微生物實驗室常用的儀器設備包括：冰箱、培養箱、高壓滅菌器、超凈工作臺、顯微鏡、溫度計、紫外燈等。使用儀器設備的人員必須熟悉和掌握操作規程，防止操作不當造成事故。

1.3 環境設施

水質微生物檢測很大程度上會受環境影響，因此需要做到如下幾點。第一，保持實驗室內良好的通風和無塵狀態——為減少灰塵、大氣流、溫度變化等因素產生的影響，安裝空調是解決這些影響因素的最佳方式之一。第二，每次接種前，需將無菌室用紫外燈消毒30分鐘，消毒完畢后關閉紫外燈，等待30分鐘后人員方可進入無菌室;人員進入無菌室后需打開超凈工作臺后方可工作;工作完畢后需再次將紫外燈打開殺菌。第三，微生物檢驗室應盡量避免外來人員出入，以減少空氣流動，避免不潔空氣的帶入。第四，在樣品移至無菌室前，須先將采樣瓶體外壁用酒精棉擦拭，然后換上無菌工作服和拖鞋，戴好手套、口罩等，再將其移至無菌室內，從而避免與實驗室內部環境發生交叉污染。第五，無菌室應定期進行沉降菌的測試和環境的驗證，環境合格后才能開展檢測工作。沉降菌的測試方法[1]為，采用大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)配制的培養皿采樣后，置于30~35℃培養箱中培養，時間不少于2d。每批培養基均應設置對照試驗，以檢驗培養基本身是否被污染。

1.4 樣品的采集和保存

1.4.1 樣品的采集

水樣應使用121℃經15min高壓滅菌處理的玻璃瓶采集。同一水源且同一時間采集幾類檢測指標的水樣時，應先采集供檢測微生物指標的水樣，且采樣時應直接采集，不得用水樣涮洗已滅菌的采樣瓶，以避免手指和其他物品沾污瓶口[2]。

1.4.2 樣品保存

采集的水樣應立即送檢，時間不得超過2小時。如無法及時送檢，應將樣品置于冰箱中，但不得超過24小時，否則會影響檢測結果[3]。

1.5 培養基的制備

培養基是促使微生物生長繁殖、分離微生物純種，以及鑒別微生物的營養物質。培養基的制備是微生物檢測工作中最為重要的環節之一。培養基經過稱量-調整pH值-加熱煮沸-過濾-分裝容器-滅菌-備用等一系列制備過程后，應能達到微生物生長所需的要求，如未能達到要求，微生物就不容易生長或不生長。由于培養基富含營養物質，易被污染或變質，故配好后不宜久置，最好現配現用。此外，培養基的質量、配制過程及保存方式都會直接影響檢測結果的準確性。

2 水質微生物檢測結果的質量控制

2.1 提高檢驗人員的素質水平

檢驗人員自身素質水平的高低會直接影響到微生物檢驗結果的準確性，因此可采取以下控制措施。

①檢驗人員要嚴格規范檢驗操作流程，在實驗中對每個操作步驟、每個檢測環境都做到嚴密監控。

②提高每位檢驗人員的素質和專業技能，經常針對檢驗人員進行專業知識和操作技能的培訓，確保每位檢驗人員以高度的責任心做好每個檢驗環節，從而提高微生物檢驗的準確性。

③采集樣品時要嚴格控制樣品質量，因為樣品質量的好壞將直接影響最終檢驗結果的準確性。因此，在進行檢驗樣品的采集、處理、運送及儲存時，一定要按照操作流程嚴格操作，這樣才能夠有效提高檢驗的質量。

2.2 做好培養基的質量控制

①每一批新購進的培養基一定要由專人仔細核對其名稱、規格、數量、成分、外觀特征、批號、保質期等是否符合要求，并做好記錄[4]。

②每次配制好的培養基應填寫好《培養基配置記錄表》，且必須選取部分培養基放置于36±1℃培養箱內培養24小時，無雜菌生長即可待用。如發現破裂、水分侵入、色澤異常、有菌生長等，均應挑出棄用。

③已制備好的的培養基不宜保存過久，應存放于4℃冰箱內。同時，每批培養基應注明名稱及配置日期。

2.3 加強檢測環境及儀器設備的管理

微生物實驗室應具備監測和控制環境條件的能力——組織人員對環境進行監控，并保存好相應的環境監控記錄。同時，應保證工作環境滿足檢驗檢測工作的要求——當環境條件不利于檢驗檢測工作的開展時，應停止檢驗檢測活動，在進行有效處置后方可恢復。在水質微生物檢測工作中，工作環境要滿足相關檢驗檢測標準或技術規范的要求，特別要對無菌室進行定期消毒，確保檢驗環境的無菌狀態，從而保證檢測結果準確可靠。

凡對檢驗檢測結果的準確性有顯著影響的儀器設備，在投入使用前必須經過法定計量機構的檢定或校準。此外，使用中的儀器設備需按規定時間定期檢定并進行日常維護，確保其功能正常并防止性能退化，進而保證檢驗檢測結果的質量。

2.4 實驗室間質量控制

為了保證檢驗檢測結果的準確性，實驗室除內部質量控制外，還需建立實驗室間質量控制制度。開展實驗室間比對能不斷提高實驗室的檢測能力，監控實驗室的持續能力，從而識別并縮小實驗室之間檢測結果的差異，提高各實驗室間的微生物檢驗質量，進而獲得可比性較高的準確檢驗結果。

參考文獻：

[1] GB/T 16294-2010《醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試方法》[S].

[2] GB 5750.12-2006《生活飲用水標準檢驗方法水樣的采集與保存》[S].

[3] GB 17378.7-2007《海洋監測規范》第7部分：近海污染生態調查和生物監測[S].

[4] 劉榮華.微生物檢測中培養基的制備及注意事項[J].當代臨床醫刊，2015，28(1)：1236.