色譜條件色譜柱采用250mm×4.6mm，5µm;柱的溫度35℃;流量是1.0mL·min-1，檢測的波長是265nm，經驗的量是20µL。將乙腈設為A，0.08mol·L-1乙酸溶液設為B，梯度洗脫的流程是：0-10min，A由10%上升到60%，保持10分鐘;20-20.05分鐘，A由60%下降到10%，保持9.95分鐘。

　　試驗方法首先是對樣品的提取，將5g的魚肉放入50ml的離心管中，添加20ml的乙腈溶液和10g的烘干的無水硫酸鈉，順時針搖晃2分鐘，靜止放置10分鐘，分離上清液。在剩余的殘渣中加入20ml的乙腈，重復上述工序，并分離上清液。其次是對提取的樣品進行脫脂處理，在進行蒸發至干以后，加入1.0ml的乙腈飽和正己烷進行去油凈化處理，離心以后，提取最下層的乙腈液，經過過濾，使用高效液相色譜儀進行檢測。

　　結果與討論,在進行磺胺類、硝基呋喃類、喹諾酮等的分離過程中，要使用C18的反相柱，在使用的過程中，考察了四種色譜柱，其中考察相對最好的是Symmetry C18柱，因此，在進行實驗的時候，要采用這種色譜柱。

　　流動相組成及洗脫程序的選擇

　　有效的調節流動相的pH數值，可以抑制磺胺類、硝基呋喃類、喹諾酮等的弱堿解離現象，改變了色譜峰的保留時間。通過試驗得出，當酸性過高的時候，磺胺類不容易分解，并損傷色譜柱;當酸性過低，色譜峰出現的拖尾的情況。在進行試驗的時候，要選擇0.08mol·L-1的乙酸溶液對流動相的酸度進行有效的控制與拖洗，選擇合適的梯度條件，有效的進行了抗生素的分離，保證分離度大，峰形尖銳，對稱性好(圖1是抗生素的色譜圖)。

圖1 抗生素色譜圖

　　提取液的選擇

　　選擇乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇等，按照合理的比例調試成混和溶液，通過試驗證明：二氯甲烷、乙酸乙酯可以有效的提取出類脂物，很難發生脫脂反應。乙腈可以改變動物的蛋白質，可以有效的提取出動物身上的藥物成分，是非常好提取劑。同時，加入少量的硫酸鈉可以促進蛋白質的改變，預防樣品變形等作用。凈化的選擇對不同類型、不同種類、不同填料量的化合物進行比較與分析，得出了基于不同的目標化合物要使用不同的凈化方法?；前奉?、硝基呋喃類抗生素要使用中性氧化鋁柱進行凈化處理，選擇的這種凈化劑具有很強的吸附作用，表明是中性的，易于保留雜環類。喹諾酮類要使用C18固相萃取柱進行凈化活動。

　　標準曲線和檢出限

　　使用乙腈將一定量的1.0mL·L-1稀釋成0.05,0.1,0.2,0.5的標準量，進行有效的測定。將峰面積A設為線性的回歸，范圍保持在0.05-1.0之間，得到結果如表1。計算出的檢出限結構如表1。

　　方法的回收率和精密度

　　將六份的羅非魚、鳙魚、對蝦空白樣品，分別加入不同濃度的抗生素化合物進行有效的回收率試驗過程，得到結果如表2，圖2表示的是試驗的色譜圖。通過試驗證明，這種方法可以有效的去除水產品中的殘留抗生素。