真菌毒素的危害、限量標準及快速定量檢測方法
□ 上海飛測生物科技有限公司 供稿
一種真菌可以產生多種不同的真菌毒素,不同的真菌亦可產生相同的真菌毒素。目前已知能產生真菌毒素的真菌有150余種,產生的真菌毒素約有300種,其中包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮以及其衍生物類毒素、A型單端孢霉烯族、B型單端孢霉烯族等。一般真菌的生長和繁殖都需要一定的溫、濕度條件,最適宜生長溫度一般為20~30℃。當真菌處于干燥、低溫或與其他真菌競爭的應激情況時,就會產生霉菌毒素,由于真菌生長有一定的地域性,因此,不同區域占優勢的真菌毒素種類也不同。真菌毒素的分類
主要的真菌毒素有以下幾種:
DON(嘔吐毒素)
DON主要以玉米污染最為嚴重,其次為小麥麩,小麥及菜棉籽粕中的檢出率顯著低于前者。抽樣檢測中配合飼料檢出率100%,仔豬配合飼料超標率46%,肉大雞配合飼料未見超標,并且禽類對DON耐受性較強,而豬較敏感,仔豬尤為如此。
AFT(黃曲霉毒素)
蛋白原料易受到霉菌的感染,如花生、大豆、棉籽粕、苜蓿草等?;ㄉ鷺O易感染黃曲霉菌,因此在使用花生麩時應嚴格檢測其中黃曲霉毒素的含量。另外,玉米中也較易感染黃曲霉毒素。
在全國內抽樣的1000份飼料中,黃曲霉毒素B1含量由高到低依次為棉粕、家禽配合飼料、菜粕、玉米、仔豬配合飼料、麥麩、豆粕、魚粉和小麥。我國飼料普遍受到黃曲霉毒素B1的污染,其含量在不同區域和飼料種類間存在差異。
ZEN(玉米赤霉烯酮)
玉米赤霉烯酮對畜禽的毒副作用主要表現為雌性激素亢進,能引起豬和牛的不孕或流產。豬對霉菌毒素敏感,特別是哺乳或哺乳仔豬。在所有家畜中,豬對ZEN最為敏感,飼料中含有1mg/kg以上的ZEN就足以引起豬的雌激素中毒癥,玉米赤霉烯酮主要污染玉米,也可污染小麥、大麥、燕麥和小米等。
OTA(赭曲霉毒素)
OTA主要產生菌是赭曲霉、純綠青霉,這類產毒素的真菌廣泛生棲在玉米、大麥、小麥、花生、大豆、高粱、蕎麥、大米、棉籽以及某些青干飼草中,動物食用被其污染的原料生產的飼料,可引起中毒。OTA對食品污染的范圍較廣,包括谷物、咖啡豆、豆類、可可豆、葡萄干、啤酒和葡萄汁等。
FB1(伏馬毒素)
伏馬毒素(Fumonisins)是一類霉菌毒素,又名煙曲霉毒素,廣泛存在于玉米、小麥、大米等糧谷類食品中,對人體健康有潛在的危害,在食品霉菌污染方面僅次于黃曲霉毒素。
TS-2(T-2毒素)
T-2毒素是單端孢霉烯族毒素中毒性最強的一種,廣泛存在于自然界中。T-2毒素具有致畸性和弱致癌性,主要損傷動物機體的造血器官(抑制骨髓和脾的再生造血功能)、免疫器官(降低免疫功能)、消化系統(引起消化道出血壞死)、神經系統及生殖系統等。
真菌毒素對動物和人的危害
真菌毒素類是由真菌類產生的具有毒性的次生代謝物,廣泛污染農作物、食品及飼料等各種植物性產品(李鵬等,2005)。真菌毒素的特點主要有:普遍性、微量性、蓄積性、隱蔽性、協同性。危害人類健康的真菌毒素主要來源于麥角菌、曲霉、青霉、鐮刀菌和鏈格孢的次生代謝產物(D'Mello,2003)。產毒真菌類污染食品后,可使食用者中毒,有些毒素甚至可以誘導基因突變和產生致癌性作用,有些則顯示出對某些特定器官的毒性。
中國及主要國家對真菌毒素的限量標準



目前檢測霉菌毒素的方法主要分為兩大類:確認方法和快速方法。確認方法主要基于理化儀器設備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯用技術如氣質聯用(GC-MS)、液質聯用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學基礎上的免疫分析方法,如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析方法等。


上海飛測生物科技有限公司基于領先的熒光定量FPOCT技術平臺,開發出黃曲霉毒素熒光定量快速檢測系統,結合了膠體金快速、酶聯免疫定量以及色譜法準確的特點,僅需8min即可快速準確定量地測定出糧油谷物飼料中的黃曲霉毒素,靈敏度高(0.5ppb),線性范圍寬(1~75ppb),結果高度符合國標法,為黃曲霉毒素的快速檢測和控制提供了一種全新的技術手段。

將樣品滴加在加樣區時,樣品中的待測物與結合墊中的熒光微球標記抗體結合并通過毛細作用向前層析,當達到檢測區后,檢測線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標記抗體結合,檢測線T線上結合的熒光微球標記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,質控線C線結合的熒光標記物樣品中待測物的量無關,其它熒光標記物繼續層析達到吸收區。層析結束后,采用熒光讀數儀的讀取T線和C線的熒光強度并計算T/C值,通過儀器內置的標準曲線即可計算出樣品中待測物的含量。
上海飛測黃曲霉毒素FPOCT快速定量檢測方法的特點
◆8min快速準確定量: 集膠體金快速檢測、酶聯免疫定量檢測、色譜質譜準確檢測的特點于一身,可在8min內實現黃曲霉毒素的快速準確定量測定。
◆小巧便攜:既可用于實驗室常規檢測,也可用于收糧現場快速檢測。
◆內置定量標準曲線:儀器內置標準曲線,無需檢測時再做標準曲線,既節省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保障操作人員的安全。
◆隨到隨檢:對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,檢測成本無區別。
◆基質干擾?。夯跁r間分辨熒光技術原理,有效降低基質干擾,既適用于小麥、玉米、高粱等原料檢測,也可對DDGS、麩皮、粕類等特殊樣本檢測,無需對提取液進行任何pH的調節,操作方便,結果準確。
◆操作簡便:樣品提取完后僅需一步加樣即可,操作及其簡便和人性化,操作人員僅需短期培訓就能熟練掌握。
◆遠程網絡支持:儀器可通過網絡自動進行標準曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質量控制等。
◆數據上傳及溯源管理:熒光定量分析儀具備數據無線上傳的功能,可根據客戶的需求定制開發相應的數據管理和溯源管理系統,實現公司總部對各分公司、上級監管部門對下級監管部門或者監管部門對各監管對象檢測數據的實時掌握和分析。
◆性價比高:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜質譜檢測的質量和結果,并且節省人力物力,大幅降低檢測費用。

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